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绿色荧光蛋白标记的骨髓间充质干细胞在脑缺血大鼠体内迁移的实验研究

王晔  邓宇斌  李燕  叶伟标  叶美红  
【摘要】:目的:探讨基质细胞衍生因子-1α(stromal derived-factor-1α,SDF-1α)对骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cell,BMSC)在SD大鼠脑缺血后迁移至脑损伤区影响的机制研究。方法:构建大脑中动脉阻塞的脑缺血模型;50只大鼠随机分为正常对照组,脑缺血PBS对照组,脑缺血MSCs治疗组。将腺病毒携带的eGFP(enhance green fluorescent protein)标记的MSCs,在脑缺血1d后经尾静脉注射入大鼠体内;用Real time RT-PCR检测缺血半暗带区基质细胞衍生因子-1α(stromal cell-derived factor-1α,SDF-1α)的分泌;用流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞上CXCR4的表达率;用荧光共聚焦显微镜扫描显示骨髓间充质干细胞的迁移。结果:GFP转染率大约87%转染骨髓间充质干细胞;荧光定量RT-PCR显示大鼠海马分泌的SDF-1α在1d时达到峰值,1-14d一直维持在较高的水平,14d后开始缓慢下降,而皮质分泌的SDF-1α在第3d开始缓慢上升,14d才达到峰值;流式细胞仪检测BMSCs表面的CXCR4有14%;GFP标记的BMSCs移植后6h发现聚集在大脑中动脉起始处(嗅球),在第3d后在丘脑等缺血半暗带区,在14d后皮质处的GFP~+BMSCs已有明显的增加。结论:损伤组织分泌的SDF-1α可促进CXCR4阳性的骨髓间种质干细胞的迁移。这可能是骨髓间充质干细胞促进脑缺血等中枢损伤性疾病修复的治疗机制之一。

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