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单链Fv片段与趋化因子融合型疫苗表达质粒的构建

王福旭  赵冰  程云会  潘崚  董作仁  
【摘要】:正目的构建Balb/c小鼠来源的B细胞淋巴瘤(A20)独特型疫苗,即scFv与趋化因子融合型疫苗表达质粒。方法与结果 (一)A20细胞株的培养:A20细胞株是BALB-c小鼠源B细胞淋巴瘤细胞株,购自美国ATCC。(二)TRIZOL一步法提取细胞总RNA.(三)重链可变区(VH)片段的扩增及测序:根据文献报道A20vH序列并与Genebank核对无误,在线http://frodo.wi.mit.edu/cgi-bin/ primer3/primer3-www.cgi设计引物,扩增片段403bp。PCR体系:共50μL,94℃,40s;61℃,35s; 72℃,1min。35循环。72℃,10min。2%琼脂糖凝胶电泳,紫外透射仪凝胶成像下观察结果,测序后

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