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减毒沙门氏菌介导的血小板第四因子活性片断(PF4_(17-70))促进放射损伤小鼠的恢复

刘斌  杨仁池  赵丽华  冯义  余晓菲  韩之波  韩忠朝  
【摘要】:正目的放射诱导的细胞毒反应常导致骨髓衰竭,这使得放射损伤成为临床常见的并发症之一。本实验研究PF4活性片断(PF417-70)的放射保护作用,并探讨利用减毒的沙门氏菌作为口服基因治疗载体来介导PF417—70进行基因治疗的可行性。方法利用基因多肽合成仪合成PF417—70 多肽,小鼠注射多肽后给予亚致死剂量全身放射线照射,观察小鼠的存活情况。小鼠给予腹腔注射5 -FU(150mg/kg体重),注射后第6天分离小鼠骨髓细胞,即5-FU抵抗的小鼠骨髓细胞。 PF417-70和5-FU抵抗的小鼠骨髓细胞预孵育后进行照射,观察细胞的存活和增殖能力。构建 PF417-70的真核表达载体,鉴定正确后转化减毒的沙门氏菌。给予小鼠喂饲携带PF417-70基因的减毒沙门氏菌后对小鼠进行全身照射,观察小鼠的存活情况,在照射后的第7天和14天每组取3只小鼠,断颈处死后分离小鼠骨髓细胞,计数小鼠的骨髓细胞数,取骨髓细胞进行集落培养,标记小鼠骨

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