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何首乌中芪合酶基因的克隆、鉴定及其功能分析

生书晶  柳忠玉  邵利  赵炜  赵树进  
【摘要】:目的克隆中药材何首乌中的芪合酶(stilbene synthases,STS)基因FmSTS,并对其在植物体内的代谢功能进行研究。方法将FmSTS基因插入pET-28a(+)载体使其在大肠杆菌BL21中表达,对重组FmSTS蛋白进行酶催化反应,鉴定其生化功能;通过农杆菌介导法将FmSTS基因转化拟南芥,HPLC和质谱分析FmSTS基因在拟南芥中的代谢产物。结果在大肠杆菌中特异表达的重组FmSTS蛋白具有天然STS的活性,能够催化底物生成白藜芦醇。转基因拟南芥中也生成了芪类代谢产物——白藜芦醇苷。结论 FmSTS基因能够催化合成芪类代谢产物,为进一步研究其在何首乌中芪类物质合成中的功能提供了理论基础。

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