收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

狂犬病病毒核蛋白的体外表达及其免疫原性研究

曹守春  李加  王玲  唐建蓉  刘景华  曲小肃  吴小红  石磊泰  董关木  俞永新  
【摘要】:目的研究狂犬病病毒核蛋白在保护性免疫应答中的作用。方法 RT-PCR获得狂犬病病毒CVS-11株的核蛋白全长基因,并克隆至原核表达载体pET30a(+),获得重组表达质粒pET30a-N,转染BL21(DE3)菌株,在体外进行核蛋白的表达,Ni2+柱纯化。纯化后核蛋白以氢氧化铝为佐剂免疫Balb/c小鼠,ELISA检测小鼠特异性抗核蛋白抗体,同时进行病毒攻击法以评价核蛋白所诱导的保护性免疫应答情况。结果本研究成功构建狂犬病病毒核蛋白重组表达质粒pET30a-N,并在体外获得高效表达和纯化核蛋白,目标蛋白主要以包涵体形式存在,占菌体总蛋白的35%左右。ELISA检测小鼠血清中抗核蛋白特异性抗体滴度对数的GMT值为3.81±0.22。加氢氧化铝佐剂的重组核蛋白免疫小鼠后进行狂犬病病毒CVS株攻击保护率可达41.7%。结论狂犬病病毒核蛋白获得成功表达和纯化,数据显示具有良好的免疫原性,并可对狂犬病病毒攻击产生一定的保护效果。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 尹伟;徐洁萍;张金阳;颜焰;周继勇;;狂犬病病毒核蛋白在Bac-To-Bac/AcMNPV杆状病毒系统的表达[J];中国预防兽医学报;2010年02期
2 杨瑞梅;崔燕;杨松涛;王承宇;单虎;王化磊;夏咸柱;;基于狂犬病病毒G蛋白scFv介导的靶向shRNA制备与鉴定[J];微生物学报;2010年02期
3 雷永良;王晓光;陶晓燕;李浩;孟胜利;陈秀英;柳付明;叶碧峰;唐青;;浙江地区鼬獾和犬源狂犬病病毒分离株全基因组测序与分析[J];病毒学报;2010年01期
4 黄莹;唐青;张守峰;扈荣良;;负链不分节段RNA病毒反向遗传系统中通用型真核表达载体的构建[J];病毒学报;2010年01期
5 郭利敏;乔传玲;陈艳;杨焕良;张健;辛晓光;陈化兰;;H3N2亚型猪流感病毒核蛋白基因的优化表达及抗原性分析[J];中国兽医科学;2010年03期
6 冯润;孙坚;王农荣;杨斌;何士勤;;甲型流感病毒核蛋白基因的真核质粒的构建及其表达[J];江西医药;2010年01期
7 ;科技前沿[J];今日畜牧兽医;2010年03期
8 张喆;李巍;;帕金森病会表现为母系遗传吗?[J];遗传;2010年03期
9 毛三英;郭霄峰;何敏;马勇江;范小龙;剡海阔;马红娜;邓衔柏;;狂犬病病毒HepFlury株P蛋白单克隆抗体的制备及间接免疫荧光检测方法的建立[J];中国兽医杂志;2010年03期
10 江燕;罗永煌;;抗狂犬病病毒单克隆抗体的研究进展[J];畜牧市场;2010年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 江飙;郑佳琳;张东霞;郭霄峰;;全序列密码子优化对狂犬病病毒基质蛋白原核表达的影响[A];2010全国狂犬病防控高层论坛论文集[C];2010年
2 孟先明;潘艳;蔡新斌;陆专灵;梁湘;唐海波;杨剑;张红普;罗廷荣;;狂犬病毒ERA株基质蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备[A];2010全国狂犬病防控高层论坛论文集[C];2010年
3 刘桂林;张议文;王志宇;梁仲;张珊珊;;低致病性AIV H9N2亚型核蛋白基因的克隆测序及生物信息学分析[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年
4 王栋;;兽用狂犬病灭活疫苗研制[A];2010全国狂犬病防控高层论坛论文集[C];2010年
5 扈荣良;;野生动物狂犬病和相关问题[A];2010全国狂犬病防控高层论坛论文集[C];2010年
6 Anthony R.Fooks;;狂犬病病毒在易感细胞及小鼠体内感染的RNA干扰[A];2010全国狂犬病防控高层论坛论文集[C];2010年
7 黄元;向华;陈晶;向蓉;张健騑;宣华;;狂犬病病毒RT-LAMP检测方法的建立及检测试剂盒的研制[A];2010全国狂犬病防控高层论坛论文集[C];2010年
8 祝俊杰;;北京市犬类防疫管理与狂犬病防控措施[A];2010全国狂犬病防控高层论坛论文集[C];2010年
9 秦海斌;朱骞;温海;张汇东;;中国工作犬狂犬病感染的风险因素分析与预防策略[A];2010全国狂犬病防控高层论坛论文集[C];2010年
10 丁继超;张海林;章域震;杨卫红;冯云;李浩;唐青;;云南省狂犬病病毒分子流行病学研究[A];2010全国狂犬病防控高层论坛论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 任继玲;动物特异性CpG ODN的设计、筛选及对疫苗的增效作用[D];吉林大学;2010年
2 陶丽红;狂犬病Flury病毒致弱分子机制及新型疫苗的研究[D];中国农业科学院;2010年
3 温永俊;表达树突状细胞激活因子重组狂犬病病毒的构建及其免疫学研究[D];中国农业科学院;2010年
4 孟胜利;中国流行的狂犬病病毒时空进化分析[D];武汉生物制品研究所;2010年
5 黄莹;狂犬病病毒CTN株反向遗传系统的建立[D];吉林大学;2009年
6 郭秀侠;冻干人用狂犬病脂质体疫苗的研究[D];吉林大学;2009年
7 刘富强;湖南省1988~2007年狂犬病流行病学研究[D];中南大学;2009年
8 魏海峰;不同术式健侧颈7神经根移位对幼年大鼠全臂丛根性撕脱伤术后脑功能重塑影响的实验研究[D];复旦大学;2008年
9 韩小虎;狂犬病毒单克隆抗体的研制及应用研究[D];吉林大学;2007年
10 刘合宾;汉坦病毒疫苗株Z10(HINV)与Z37(SEOV)核蛋白表达及生物学功能研究[D];浙江大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 江燕;识别构象型抗原表位抗狂犬病NP单抗研究[D];西南大学;2010年
2 于金宁;中国狂犬病毒时空动力学及其与狂犬病疫情的关系[D];山东大学;2010年
3 吴慧;中国狂犬病流行现状及病毒P、M基因遗传进化研究[D];山东大学;2010年
4 孙宇;禽流感病毒血凝素的分离纯化以及快速评估其宿主特异性方法的研究[D];西北大学;2010年
5 谢天胜;浙江省一起麻疹爆发的临床特征和基因变异观察[D];浙江大学;2010年
6 李云霞;抗狂犬病病毒单克隆抗体的制备和鉴定[D];内蒙古大学;2010年
7 吴学闯;利用NTT系统筛选大豆重要抗逆基因及转DREB基因小麦抗逆性鉴定[D];西北农林科技大学;2010年
8 范晓娟;犬、猫狂犬病病毒抗体检测方法的建立[D];中国农业科学院;2010年
9 赵刚;狂犬病病毒P蛋白的原核表达及间接ELISA检测方法的建立[D];湖南农业大学;2010年
10 靳玉珠;狂犬病病毒感染N2a细胞蛋白质组学研究[D];吉林大学;2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 李杏;玉溪狂犬病防控现状调查[N];玉溪日报;2010年
2 ;孩子遭遇小外伤 科学处理好[N];中国人口报;2010年
3 YMG记者 于明君 通讯员 刘正毅 王曰雷;夏季“被狗咬”市民增多[N];烟台日报;2010年
4 本报记者 杜安娜;谈“犬”色变多年 “十天观察法”为何难推广[N];广州日报;2010年
5 瑞丽市畜牧兽医站 杨国平;秋季畜禽发病特点及防治措施[N];云南科技报;2009年
6 中国疾控中心传染病所 张永振;我国狂犬病病毒及其传播流行规律[N];健康报;2009年
7 记者 王东亮;未免疫无症状犬咬人将施安乐死[N];北京日报;2009年
8 记者王乐民;问题人用狂犬病疫苗效价不达标[N];健康报;2009年
9 华夏;兽用新型疫苗[N];山东科技报;2008年
10 朱本浩;假期儿童常见意外的处理[N];中国中医药报;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978