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雾化吸入羟基喜树碱对小鼠黑色素瘤肺转移的药效学及体外作用机制研究

胡巍  张超  方芸  
【摘要】:目的肺是其他部位原发癌症最易转移的部位之一,致死率极高,目前还缺乏有效的治疗药物。10-羟基喜树碱(HCPT)被证实对多种肿瘤均有治疗作用。本实验目的为考察雾化吸入HCPT能否有效抑制小鼠黑色素瘤肺转移,并从体外考察该抑制作用是否与诱导肿瘤细胞产生凋亡相关。方法体外黑色素瘤B16-F10细胞与不同浓度HCPT分别作用24、48、72h,MTT法考察HCPT对细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪测定不同浓度HCPT下的细胞凋亡率,并利用Hoechst 33258染色观察凋亡细胞形态。同时建立小鼠黑色素瘤肺转移模型,按0.8 mg·Kg~(-1)的剂量雾化吸入HCPT注射液,考察HCPT对小鼠黑色素瘤肺转移的抑制作用,并以相同剂量静脉注射、腹腔注射给药做对照。结果 HCPT对B16-F10细胞增殖有显著的抑制作用,并呈浓度和时间依赖性,5~50μM HCPT作用48h后可诱导细胞产生凋亡,凋亡率分别为20.4%、23.1%、42.3%及67.6%。Hoechst 33258染色观察可见典型的细胞凋亡特征,如,染色质浓集、核破碎等。体内药效结果表明,同腹腔及静脉注射相比,雾化给药组小鼠肺癌转移结节数、肺湿重、肺癌面积等参数明显少于模型组,病理组织学检查显示雾化给药组动物肺脏组织状况有所改善。结论该研究表明HCPT可通过诱导细胞凋亡产生抗肿瘤作用,雾化吸入后对于黑色素瘤肺转移癌症治疗效果明显,具有一定的应用前景和深入研究的潜力。

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