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H-2Kd基因siRNA表达质粒的构建与鉴定

庄学伟  邹雄  张义  王洪春  杨晓静  单宁宁  
【摘要】:目的:构建针对BALB/C小鼠H-2Kd基因siRNA表达质粒,为进一步研究H-2Kd基因功能奠定基础。方法:选择 siRNA干涉靶序列,体外合成两段互补的寡核苷酸,通过与线性化的pSilencer3.0-H1连接,转化大肠杆菌DH5a扩增纯化得到所需质粒,通过琼脂糖凝胶电泳及基因测序鉴定其分子量及插入片段的序列。结果:纯化的质粒的分子量为2.8Kb,插入的寡核苷酸序列与设计的序列完全相符.结论:成功构建了针对H-2Kd基因的siRNA表达质粒。

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