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TILLING及其在水稻育种中的应用

闫双勇  刘学军  苏京平  马忠友  孙林静  
【摘要】:正定向诱导基因组局部突变技术(Targeting Induced Local Lesions in Genomes,TILLING)是功能基因组研究中应用的一种反向遗传学技术。其主要步骤如下:1建立EMS突变群体。2群体分单株 DNA提取及分组混合(一般是8个个体一组)。3用基于特定基因设计的引物(引物用双色荧光标记) 以混合后的DNA作摸板进行PCR扩增。4扩增产物通过变性及复性后,用核酸内切酶CEL I处理;如果存在SNP则会产生含错配碱基的异源双链,CEL I可以在异源双链上错配碱基位置产生缺刻。5处

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