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韩红兵徐署光连正兴陆泉枝李宁  
【摘要】:IL-12是调节体内产生免疫反应的一个重要细胞因子,是目前所有发现的细胞因子中对体内免疫活性细胞的诱导作用和调节作用最强、范围最广的一类。IL-12由35kDa(P40)和40kDa(P40)两个亚基通过二硫键相连组成异源二聚体糖蛋白。根据已发表的IL-12两个亚基P40cDNA序列(NM_000882)与P40cDNA序列(NM_002187)设计两对引物。以LPS刺激的人脐血淋巴细胞为材料,采用RT-PCR技术从总的RNA扩增人IL-12基因,包括完整的前体蛋白编码序列。所得到的序列与GeneBank中发表的一致,但与CLMF、NKSF序列有所差异。P40同CLMF相比,244aa密码子GAC(Asp)→GAT(Asp)、247aa密码子ACG(Thr)→ATG(Met);与NKSF比较,44aa密码子GTC(Val)→GTG(Val)。P40同NKSF比较239aa密码子AAC(Asn)→AAG(Lys),291aa密码子ACC(Thr)→ACG(Thr);P40同CLMF相比较,氨基酸与核苷酸序列完全一致。通过与不同物种氨基酸及核苷酸序列比较分析,P40亚基与其他动物的同源性80%以上P40亚基与其他动物同源性在70%的水平。序列分析结果表明克隆的IL-12基因序列是正确的、可靠的。


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