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双链RNA介导的大豆油酸脱氢酶基因沉默载体的构建和转化

宋凯  李桂民  蔡一荣  陈伟  刘立侠  许守民  
【摘要】:油酸是重要的脂肪酸,具有氧化稳定性,可口的风味和有益健康的特点,提高大豆种子油酸的相对含量是大豆品质改良育种的重要内容。大豆油酸脱氢酶基因gmFAD2-1是调控大豆种子油酸代谢的关键基因。本研究利用双链RNA 介导的基因沉默原理,设计可以抑制gmFAD2-1表达的反向重复序列特殊构建,并将该构建克隆到一个能够产生无筛选标记基因的双右侧边界转化载体中,通过抑制gmFAD2-1的表达来降低油酸脱氢酶的活性,提高种子中油酸的含量。应用根癌农杆菌介导方法转化大豆,获得了几十株转基因大豆材料,经过PCR 检测所获得的转化植株,结果表明目的基因片断已整合到大豆基因组中。

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