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黄芪甲苷减轻缺氧心肌细胞氧化损伤的机制研究

胡炯宇  黄跃生  张琼  
【摘要】:目的:观察黄芪甲苷对缺氧心肌细胞氧化损伤的作用,并探讨其保护机制。方法:原代培养乳鼠心肌细胞,缺氧12h,观察黄芪甲苷作用前后细胞活力(cellcounting kit-8,CCK-8)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)含量的变化;用异硫氰酸荧光素(FITC)、辣根过氧化物酶(HRP)标记黄芪甲苷分子,激光共聚焦显微镜和电子显微镜下观察其在细胞内的分布情况;体外检测黄芪甲苷对超氧阴离子(O_2~-)和羟自由基(OH~-)的作用;检测黄芪甲苷作用前后缺氧心肌细胞SOD-1 mRNA和蛋白表达的变化。结果:缺氧12h后,LDH、MDA和ROS值升高,CCK-8、SOD活性下降,黄芪甲苷处理后LDH、MDA、ROS值下降,CCK-8、SOD活性上升;激光共聚焦显微镜下可见FITC标记的黄芪甲苷分子进入心肌细胞,主要分布于胞浆中,电子显微镜下可见HRP标记的黄芪甲苷分子主要分布于线粒体膜上;体外自由基产生体系中,黄芪甲苷对OH~-有显著清除作用,但对O_2~-无明显作用;黄芪甲苷可在常氧和缺氧条件下使SOD-1 mRNA和SOD-1蛋白表达量明显增加。结论:黄芪甲苷进入细胞后特异性地分布于线粒体膜上,它可以增加SOD-1 mRNA和蛋白表达,加快胞内O_2~-歧化反应的速度,同时黄芪甲苷分子可以与OH~-反应减少胞内OH~-的蓄积,减轻细胞的氧化损伤,使SOD等内源性抗氧化酶活性得以提高,细胞损伤和凋亡显著下降。

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