热损伤后表皮细胞培养上清诱导脂肪干细胞向表皮干细胞表型转分化的实验研究

【摘要】：目的:探讨表皮细胞烫伤上清诱导脂肪干细胞(adipose2derived stemcells,ADSCs)跨胚层向表皮干细胞表型转分化的可能性。方法:体外分离、培养ADSCs,用免疫细胞化学法、流式细胞仪法鉴定ADSCs;实验采用表皮细胞系(HaCaT)烫伤上清液,设30%条件培养基诱导组及30%条件培养基加EGF诱导组(EGF 30 ng/ml)以正常30%表皮细胞上清,正常10%fcs培养组组为对照,各组均诱导7 d,诱导后经免疫细胞化学、流式细胞仪、PCR检测CK19、β-integrin的表达。结果:1.免疫细胞化学分析表明ADSCs表达CD90,CD105而不表达CD106、CD31、CD34、CK19、;流式细胞仪检测CD90、CD105的阳性率分别为97.5%、93.2%。2.各诱导实验组细胞CK19、β-integrin阳性率较对照组显著增高(P0.05),差异有统计学意义。结论:表皮细胞烫伤上清可以诱导ADSCs向表皮细胞表型转分化,其中30%表皮细胞热损伤上清为诱导的最佳浓度。