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脆弱类杆菌LPS致脓毒症机制的初步探讨

黄晓元  任利成  宋达疆  闵安杰  周捷  
【摘要】:脓毒症是严重烧创伤患者的主要死亡原因,厌氧菌脆弱类杆菌是一种较常见的条件致病菌,在外科感染中呈上升的趋势。本研究通过分离培养脆弱类杆菌,提取细菌脂多糖,并以该细菌脂多糖刺激分化后的单核细胞株THP-1和粒细胞株HL-60及小鼠,以RT-PCR法检测TREM-1 mRNA,Western blot法检测TREM-1蛋白的表达,ELISA法检测TNF-a、IL-1b,IL-6、IL-8的含量变化。通过TREM-1 RNA干扰慢病毒载体或电转染技术,研究TREM-1基因沉默对炎症反应的影响。结果发现在脆弱类杆菌脂多糖刺激下,TREM-1表达上调,同时TNF-a,IL-1b,IL-6,IL-8分泌增加,并与TREM-1蛋白表达水平呈正相关。转染shRNA后TREM-1 mRNA及蛋白表达明显下调,同时,TNF-a,IL-1b,IL-6,IL-8含量明显降低。TREM-1 shRNA-2转染能明显抑制脆弱类杆菌脂多糖作用下DAP12、NF-kB p65蛋白的表达水平并降低TNF-a、IL-1b及IL-6、IL-8 mRNA的表达水平。运用TREM-1vshRNA干扰技术,可以有效降低脆弱拟杆菌脓毒症小鼠肝组织TREM-1表达水平,抑制炎性反应,提高小鼠存活率。表明TREM-1在脆弱类杆菌脂多糖诱导的炎症反应中发挥重要作用。同时证实脆弱类杆菌生长繁殖过程中所产生的短链脂肪酸能抑制中性粒细胞和成纤维细胞的相关功能,促进细胞凋亡,抑制细胞增殖。

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