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新穿膜肽蛋白His-T1-GFP的跨膜效率和细胞毒性研究

王怡  肖健  林海环  杨静  李校堃  
【摘要】:目的研究新穿膜肽蛋白 His-T1-GFP 对不同细胞的跨膜效率和细胞毒性.方法用荧光显微镜来观察 His-T1-CFP 和 His-Tat-GFP 跨膜进入不同细胞的情况;使用酶标仪检测细胞荧光强度,研究其跨膜的动力学因素,并采用细胞乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒和 MTT 法来评价它对不同细胞的毒性作用。结果在一定范围内, 穿膜肽 His-T1-GFP 能有效跨过多种细胞膜,且对 NRK52E 细胞的跨膜效率明显高于 His-Tat-GFP.该蛋白的跨膜转运效率与蛋白自身的作用时间和浓度有关,而与温度无关,当其终浓度高达5mg/mL 时,对 CNE2和 NRK52E 两种细胞几乎没有毒性作用.结论 His-T1-GFP 蛋白是一种跨膜效率高且低毒的新穿膜肽蛋白.

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