弓形虫乙肝病毒多重PCR及芯片杂交技术的研究

【摘要】：目的建立同时检测弓形虫和乙肝 DNA 的多重 PCR 和芯片杂交检测方法,为孕产妇的 TORCH 检测的进一步研究提供实验依据。方法以病人血液及弓形虫 RHA 腹水为样本,多重 PCR 方法为基础,通过基因片段筛选及引物比例调整,进行弓形虫和乙肝病毒基因片段的扩增。在此基础上,进一步建立生物芯片检测法排除了 PCR 假阳性。结果在确定合适的多重 PCR 引物比例后,扩增结果清晰可辨。在 PCR 体系中加入 Norwalk 扩增监控进一步证实了扩增结果的可靠性。芯片与 PCR 产物杂交的结果具有较好灵敏性和特异性。结论建立了的针对弓形虫和乙型肝炎病毒检测的多重 PCR 和芯片杂交方法是有效的,芯片杂交可用于对 PCR 检测结果的进一步确认。