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二膦酸盐/白介素-2诱导肿瘤患者外周血γδT细胞增殖的作用

张少云  米振国  苏晓三  张素英  王毓銮  马文昌  赵佩  
【摘要】:目的探讨二膦酸盐/白介素一2诱导实体肿瘤患者外周血γδT细胞增殖作用和体诱导γδT细胞增殖治疗肿瘤的可能性。方法52例肿瘤患者和18例正常健康人。体内增殖试验采用流式细胞仪测定用药前后患者外周血γδT细胞绝对值,计算用药后γδT细胞增殖率。体外增殖试验,采用流式细胞仪测定患者外周血经二膦酸盐/白介素-2体外刺激后γδT细胞增殖数量,计算刺激后γδT细胞增殖率。体外增殖指数%=(体外试验管γδT细胞%一体外对照管γδT细胞%)/(体外对照管γδT细胞%)×100:体内增殖指数%=(用药后外周血γδT细胞绝对数一用药前外周血γδT细胞绝对数)/(用药前外周血γδT细胞绝对数)×100;体内外γδT细胞增殖反应程度判定标准:(一)增殖指数20%;(+)增殖指数20~100%;(++)增殖指数100%~200%;(+++)增殖指数200%。结果肿瘤患者和健康人外周血γδT细胞绝对值(细胞个数/μL)、γδT细胞计数(细胞个数/μL和%)为,1249.92土614.45vs1617.56士488.97,P=0.025;74.85士64.29vs175.52士119.19,P=0.003;6.19士3.70vs10.28士5.24,P=0.001。16例经N-BPs/IL-2治疗肿瘤患者治疗前后体内外周血γδT细胞绝对值为55.29士32.10vs113.43士64.08,P=0.012,总T细胞绝对值和γδT细胞相对值体内治疗后较治疗前有明显增加,但无统计学意义。全部肿瘤患者外周血γδT细胞对N-BPs/IL-2体外诱导增殖反应阳性率为75%。经N-BPs/IL-2治疗16例体外扩增试验阳性患者体内γδT细胞均出现增殖反应,平均增殖率为228.8%。同时联合化疗2例患者体内γδT细胞均出现负增殖,平均增殖率为-56%。未用N-BPs/IL-2治疗1例患者体内γδT细胞未出现增殖,增殖率为0%。肿瘤患者体内外γδT细胞增殖试验相关分析,相关系数为1.000,P0.001。IL-2临床使用剂量成人在0.5×l06一2.0×l06IU/日之间,均可诱导γδT细胞增殖。结论(1)肿瘤患者外周血总T细胞绝对计数、γδT细胞绝对和相对计数,均显著低于正常人,提示部分肿瘤患者存在γδT细胞增殖反应功能缺陷或抑制。(2)肿瘤患者个体外周血γδT细胞对N-BPs/IL-2的刺激增殖的反应性不同,治疗前应检测患者γδT细胞对N-BPs/IL-2刺激的反应性。(3)肿瘤患者用药后(N-BPs/IL-2)体内γδT细胞绝对值显著高于用药前,N-BPs/IL-2在体内有显著增加γδT细胞绝对数量的药理作用,可用于肿瘤的免疫治疗和抗病毒治疗,以及调节免疫功能治疗。(4)化疗药物有抑制N-BPs/IL-2体内诱导γδT细胞增殖的作用,提示化疗与N-BPs/IL-2治疗不宜同时进行。(5)成人临床应用IL-2剂量在0.5一2.0×l06IU/次/日的范围内均可引起体内γδT细胞增殖。(6)γδT细胞体外增殖试验结果与体内增殖试验结果相关性一致,体外增殖试验可以作为N-BPs/IL-2方案的适应症检测指标之一。药物体内诱导免疫细胞增殖和活化治疗肿瘤及其它疾病技术,由于其科学的理论基础、简单的操作程序、低廉的费用和较小的毒副作用等优点,有望成为免疫治疗的新方法。

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