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体检幼儿TT病毒DNA检测及部分基因序列分析

潘秀珍  单祥年  唐家琪  廖晓秋  郭恒彬  李先富  
【摘要】:正1997年底,Nishizawa首次报告新分离到一种新的DNA病毒一输血传播病毒(TTV).研究表明,TTV为单链、环状DNA病毒,核酸全长约3.9kb,TTV感染与肝功能异常密切相关,可能是一种新的非甲-庚型肝炎的病原.为了解TTV在幼儿人群中的感染状况,我们对体检幼儿进行了PCR检测,并对部分阳性株进行序列测定和分析.根据okamoto所报告的基因序列,设计合成如下引物:引物①5′-ACA GAC AGA GGA GAA GGC AAC ATC-3′引物②5′-GTGGCA TTT TAC CAT TTC CAA AGT T-3′引物③5′-GGC AACATG TTA TGG ATA GAC TGG-3′,建立了检测TTV DNA的半套式PCR方法,对110名体检幼儿血清进行检测.我们采用蛋白酶K法消化被检血清,氯仿抽提核酸,进行半套式PCR扩增(第一轮PCR反应条件:模板5μl,10×PCR缓冲液

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