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花生四烯酸细胞色素P450ω-羟化酶4A14在小鼠肝脏脂质代谢中的作用

管又飞  李沙  王春炅  陈真真  周云枫  
【摘要】:目的:随着人们生活水平的提高,我国非酒精性脂肪肝的发病率越来越高。本文旨在探讨细胞色素P450ω-羟化酶CYP4A14在肝脏脂质代谢中的作用,以期为阐明非酒精性脂肪肝发生的机制提供线索。方法:(1)野生型(WT)及CYP4A14基因敲除(4A14KO)小鼠分为如下四组:1)WT+普通饮食组;2)WT+高脂饮食组;3)4A14KO+普通饮食组;4)4A14KO+高脂饮食组。3个月后实验结束,检测肝脏总甘油三酯(TG)、总胆固醇酯(TCHO)以及肝脏形态和病理改变(油红O及HE染色),并检测肝脏脂质代谢相关基因m RNA及蛋白水平的变化;(2)雄性C57BL/6小鼠分为两组:GFP腺病毒(Ad-GFP)组和CYP4A14腺病毒(Ad-CYP4A14)组,尾静脉注射Ad-GFP或Ad-CYP4A147天后留取肝脏组织,检测肝脏TG、TCHO以及肝脏形态和病理改变,并检测肝脏脂质代谢相关基因m RNA及蛋白水平的变化。结果:(1)肝脏油红O及HE染色均显示CYP4A14敲除小鼠可以显著缓解高脂饮食诱导的肝脏脂质沉积。高脂饮食诱导的野生型小鼠肝脏TG显著增加,而CYP4A14基因敲除小鼠TG增加不明显;各组间肝脏TCHO水平无显著差异。肝脏脂质代谢通路相关基因检测显示:CYP4A14基因敲除小鼠抵抗高脂饮食诱导的脂肪肝可能与脂肪酸摄取相关的重要蛋白FAT/CD36介导的肝脏脂质摄取减少有关;(2)野生型小鼠过表达CYP4A14后肝脏出现明显脂肪样变(油红O染色)和肝脏脂质聚集(肝TG增加),肝脏FAT/CD36的表达水平也显著升高。结论:CYP4A14基因敲除可以抵抗高脂饮食诱导的脂肪肝的发生,而肝脏过表达CYP4A14可以增加肝脏的脂质沉积。我们的研究提示CYP4A14可以促进肝脏脂质合成,其机制可能与CYP4A14增加FAT/CD36介导的肝脏脂质摄取有关。

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