U50,488H对低氧性肺动脉高压大鼠的血管保护作用:Akt-激活NO生成的作用

【摘要】：缺氧所致肺血管内皮损伤是低氧性肺动脉高压(HPH)的起始环节。前期研究表明κ-受体激动剂U50,488H可内皮依赖性地舒张常氧大鼠和HPH大鼠的肺动脉环,并且这一作用与NO途径高度相关,但U50,488H是否可以通过Akt-NO途径改善HPH大鼠的血管内皮功能,从而预防HPH的形成还未见报道。本研究通过透射电镜观察肺小动脉超微结构改变。正常组大鼠肺小动脉内皮完整,内皮细胞内有明显的吞饮小泡,内弹力纤维膜清晰,动脉中膜内平滑肌细胞散在分布,肌丝明显,呈收缩表型。慢性低氧2周组大鼠肺小动脉内皮向管腔内明显突出,局部内皮下层增厚明显,其内可见大量增殖、迁移的平滑肌细胞聚集,内弹性膜不完整,动脉中膜可见胶原纤维增生,表现为明显的肺血管重建特征。U50,488H预防组大鼠肺小动脉病变明显减轻,内皮呈立方形,仅可见轻度增生,内弹力纤维膜基本完整,中膜可见散在分布的平滑肌细胞,未见大量平滑肌细胞增殖和胶原纤维明显增生等表现。血管环内皮功能测定中我们利用内皮依赖性舒张剂乙酰胆碱(Ach)和非内皮依赖性舒张剂硝普钠(SNP)来检测血管环内皮是否损伤,结果发现,低氧组血管环对Ach的舒张反应明显降低(P0.05,vs.常氧组),而U50,488H预防组血管环对Ach的反应性显著增加(P0.05,vs.低氧组),三组血管对硝普钠的反应性无显著差异。TUNEL法检测肺微血管内皮细胞的凋亡发现,U50,488H可显著抑制低氧诱导的内皮细胞凋亡(P0.05,vs.低氧组),而这一作用可被Akt抑制剂和NOS合酶抑制剂L-NAME等阻断(P0.05,vs.低氧组+U50,488H)。ELISA法检测U50,488H可显著增加低氧下肺微血管内皮细胞培养液上清中NO的含量(P0.05,vs.低氧组),同样这一作用可被Akt抑制剂和NOS合酶抑制剂L-NAME等阻断(P0.05,vs.低氧组+U50,488H)。以上研究结果表明:低氧前给予U50,488H可有效保护肺动脉舒张功能,保护缺氧肺循环。U50,488H激活肺血管eNOS-NO系统,产生"硝基酯样"效应(NO生成),抑制低氧血管内皮细胞凋亡,是其改善肺血管功能,保护缺氧肺循环的重要机制。