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血管紧张素-(1-7)对脂多糖诱导血管内皮细胞组织因子表达的影响及其机制研究

胡静  王宏健  申晓辉  何晓凡  贺石林  文志斌  
【摘要】:目的:(1)观察LPS对人脐静脉血管内皮细胞株(HUVECs)TF表达的影响以及Ang-(1-7)对其的干预作用;(2)探讨Ang-(1-7)抑制LPS诱导HUVECs TF表达的作用机制。方法:HUVECs培养采用DMEM完全培养基;MTT法测细胞活力;一期凝固法测细胞促凝活性;ELISA法测TF抗原;RT-PCR测TF mRNA;免疫荧光化学观察NF-κB的变化。结果:(1)与对照组相比,不同浓度的LPS(0.01-100 mg/L)能呈剂量依从性促进HUVECs促凝活性(PCA)和TF mRNA增加(r=0.963,P0.05),在10mg/L达峰值;(2)单用Ang-(1-7)(10~(-8)-10~(-5)mol/L)对HUVECs PCA没有影响(P0.05)。但在给予LPS前30 min用Ang-(1-7)(10~(-8)-10~(-5)mol/L)预处理HUVECs,Ang-(1-7)可呈剂量依从式抑制LPS(10 mg/L)对TF表达的刺激作用(r=-0.947,P0.05),在10~(-6)mol/L时抑制作用达最强。Ang-(1-7)(10~(-6)mol/L)抑制LPS(10 mg/L)对TF表达的刺激作用也呈时间依从性,在8 h抑制作用最强。(3)一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NAME可明显阻抑Ang-(1-7)拮抗LPS促进HUVECs PCA和TF mRNA增加的作用(P0.05)。(4)免疫荧光化学染色发现LPS作用45 min可引起HUVECs内NF-κB从胞浆移入核内;Ang-(1-7)预处理15 min则可部分抑制LPS引起的HUVECs内NF-κB的转位。结论:(1)LPS能诱导HUVECs表达TF,Ang-(1-7)具有在mRNA水平抑制LPS刺激HUVECs TF表达的作用;(2)NO途径可能参与了Ang-(1-7)抑制LPS诱导HUVECs TF表达的作用;(3)Ang-(1-7)和LPS可能通过影响NF-κB的活化来改变TF的表达。

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