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三疣梭子蟹CacyBP基因的分子克隆以及盐度胁迫适应相关的研究

黄少君  许强华  
【摘要】:三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)是我国一种重要的养殖经济蟹类,盐度对它的生理生长起着重要的作用。为研究Cacy BP(calcyclin-binding protein)基因是否与三疣梭子蟹的盐度适应性有关,本实验从三疣梭子蟹鳃组织克隆出了Cacy BP基因的cDNA全长,其中开放阅读框的序列长702bp,编码233个氨基酸,蛋白质分子量为26.35 kDa,同源性分析表明PtCacyBP氨基酸与其他已知种类具有40%的同源性。为进一步研究Pt CacyBP是否与盐度胁迫有关,本实验进行了包括原核表达和真核表达在内的一系列盐度胁迫实验,即构建原核表达质粒p ET28(+)-Pt Cacy BP并在大肠杆菌DE3(BL21)中表达,构建真核表达质粒EGFP-C2-Pt Cacy BP并转染293T细胞,并且进行一系列的盐度胁迫实验。结果表明,带有重组质粒的原核和真核细胞都比插入空载质粒的生存率在盐度胁迫下有显著性的提高。因此,实验结果表明,Pt Cacy BP基因与三疣梭子蟹的盐度适应性相关。

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