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白鲢鱼葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)的纯化及其对肌原纤维降解的抑制作用

张超群  曹敏杰  
【摘要】:采用硫酸铵分级沉淀、Q-Sepharose阴离子交换层析、SP-Sepharose阳离子交换层析等方法从白鲢鱼骨骼肌中分离纯化得到了葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)。SDS-PAGE电泳显示有220、65和55kDa三个条带。Western blot检测结果显示,三个蛋白条带均与大鼠抗白姑鱼GPI多克隆抗体有特异性反应。通过高效液相-串联质谱进行的肽指纹图谱鉴定结果显示,得到的11个肽段与斑马鱼gpib同源性为98%,对其序列进行分析发现有多个磷酸化位点,推测GPI为磷酸化蛋白。白鲢鱼GPI能够特异抑制鲫鱼MBSP的活性,但对胰蛋白酶没有抑制效果。GPI对由MBSP引起的肌原纤维降解有一定的抑制作用。

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