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拟穴青蟹胰岛素基因的克隆及其表达研究

蒋科技  马凌波  张丹  张永  张凤英  乔振国  
【摘要】:作为一种重要的经济海洋生物,青蟹的人工养殖在水产业中占有相当的比重,但其养殖方式中生长、蜕壳难以调控。本研究从中国东南沿海分布最广的优势种拟穴青蟹中克隆得到了胰岛素基因(EC 3.4.21.4),其cDNA全长为881个碱基,开放阅读框包含780个碱基,编码的蛋白由259个氨基酸组成。基因组DNA中包含89个碱基和91个碱基的两个内含子。拟穴青蟹胰岛素蛋白的单体分子量为28.15千道尔顿,等电点为4.49。系统进化分析表明,拟穴青蟹的胰岛素基因序列与其他甲壳类动物的聚在一起,这与物种自身的进化关系相一致。荧光定量PCR分析的结果显示,拟穴青蟹中胰岛素基因mRNA的表达与其幼体的蜕壳和生长发育相关。由此可见,青蟹中胰岛素基因的进一步研究对于促进青蟹养殖的技术发展具有一定的意义。

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