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半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)W性染色体基因组的初步研究及其在育种上的应用

王旭波  张全启  齐洁  王志刚  王兴莲  
【摘要】:本研究采用染色体显微切割技术分离半滑舌鳎的W性染色体,利用DOP-PCR方法对W染色体DNA进行了扩增,构建了W染色体DNA文库,该文库共含有596个克隆。从中选取288个克隆测序,得到了259条序列。对这些序列进行了串联重复、散布重复及BLAST比对分析,结果发现共有52条串联重复序列,2条散布重复序列。其中串联重复序列中有12条微卫星序列,40条小卫星序列;而2条散布重复序列全部都是DNA转座子类型。同时,利用W染色体文库克隆的序列进行引物设计,以5条雌鱼和5条雄鱼的DNA为模板进行PCR筛选,共得到2对半滑舌鳎雌鱼的特异性引物。结合1对阳性对照引物,建立了双引物PCR法,该方法可以准确迅速地区分出半滑舌鳎的遗传性别。利用获得的雌性鉴别引物筛选出1000多条性逆转的ZW型雄鱼,并使之与正常雌鱼交配,对其后代进行雌雄检测,发现雌鱼的比例要明显高于雄鱼。该研究成果将有助于推动半滑舌鳎全雌育种的研究实施及推广进程,从而极大地提高半滑舌鳎的养殖效益。

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