硫化氢对急性大鼠缺血心肌细胞凋亡的影响

【摘要】：目的观察H_2S对急性大鼠缺血心肌细胞凋亡的影响。方法健康成年雄性SD大鼠(270±20)g,随机分为5组,分别为Ⅰ假手术组;Ⅱ缺血组;Ⅲ缺血+NaHS低剂量组;Ⅳ缺血+NaHS中剂量组;Ⅴ缺血+NaHS高剂量组。麻醉大鼠,结扎左冠状动脉前降支,NaHS低、中、高剂量组分别于缺血3h时腹腔注射0.78、1.56和3.12mg·kg~1的NaHS,缺血组注射等容量的生理盐水,假手术组只穿线不结扎。各组大鼠均于缺血6h时经颈总动脉取血迅速开胸取心脏,采用去蛋白的方法检测血浆中H_2S含量,亚甲基蓝法检测心肌组织中CSE的活性,流式细胞术(FCM)检测心肌细胞凋亡率,免疫组化法测定Bcl-2、Bax蛋白的表达,HE染色观察心肌组织学变化。结果①与假手术组大鼠比较,缺血组大鼠血浆中H_2S含量和心肌组织中CSE活性明显降低(P0.05)。与缺血组大鼠比较,缺血+NaHS低、中、高剂量组大鼠血浆中H_2S含量和心肌组织中CSE活性明显升高(P0.05或0.01)。②与假手术组大鼠比较,缺血组大鼠心肌细胞凋亡率、Bax表达阳性细胞数百分率明显升高(P0.01),缺血+NaHS低、中、高剂量组大鼠心肌细胞凋亡率、Bax表达阳性细胞数百分率明显低于缺血组,Bcl-2表达阳性细胞数百分率明显升高(P0.05或P0.01)。③HE染色光镜观察心肌组织形态学变化:假手术组大鼠心肌细胞排列整齐,着色均匀。缺血组大鼠部分区域心肌纤维横纹不齐或消失,核偏移甚至裂解消失,有炎性因子渗出,NaHS低、中、高剂量组大鼠也有心肌细胞变性的改变,但程度较缺血组轻。结论硫化氢对大鼠急性心肌缺血具有一定的保护作用,上调凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达,下调促凋亡蛋白Bax表达,抑制细胞凋亡可能是其保护作用机制之一。