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Ⅰ型鸭病毒性肝炎VP1基因的克隆与原核表达

辛英豪  高继明  刘标  李莎莎  姜世金  
【摘要】:根据已测得的DHV-ⅠLY株的序列设计了带酶切位点的特异性表达引物,通过RT-PCR方法克隆出DHV-ⅠLY株的VP1基因片段,用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切目的片段与表达载体pET-32a(+)后构建重组载体,获得重组质粒PET-VP1,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)Plys,经IPTG诱导,SDS-PAGE检测结果表明,PET-VP1在Rosetta(DE3)Plys中表达了一个相对分子量为47kD的融合蛋白。Western-blotting分析表明此蛋白能被鸡抗DHV-Ⅰ血清所识别,说明表达的VP1蛋白具有良好的抗原性。

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