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陆地棉叶绿体超氧化物歧化酶基因的克隆与植物表达载体的构建

胡根海  喻树迅  范述丽  宋美珍  王清连  付远志  
【摘要】:棉花的叶绿体铜锌超氧化物岐化酶(Cu/Zn-SOD)是一种核基因编码并定位于叶绿体的蛋白质,是棉花体内清除超氧阴离子自由基的主要酶类。采用 RT-PCR 方法,从陆地棉中克隆到了 Cu/ Zn-SOD 的 cDNA 编码区。构建了中介重组质粒 pUC-SOD,经 PCR、酶切检测和测序后证明序列正确。利用序列正确的中介重组质粒 pUC-SOD,双酶切,构建了植物表达载体 pBI—SOD,验证正确后并转入了根癌农杆菌 LBA4404中,为转基因做好准备。

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