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SB203580对脂多糖抑制牙髓细胞碱性磷酸酶活性的影响

王凤明  胡涛  谭红  周学东  
【摘要】:目的:探讨p38MAPK信号通路阻断剂对脂多糖抑制牙髓细胞碱性磷酸酶活性的影响。方法:Ⅰ型胶原酶(3mg/mL)消化牙髓组织块法体外培养人牙髓细胞,选取生长良好的第4~8代细胞用于实验。免疫荧光染色激光共聚焦显微镜观察脂多糖 (5μg/mL)刺激后牙髓细胞内p38MAPK信号蛋白的活化向细胞核内转位过程。细胞生长达到汇合状态后,采用特异性阻断剂 SB203580(10μmol/L)阻断p38MAPK信号通路,使用相当浓度的SB203580的溶剂二甲亚砜作为对照,预处理后加入脂多糖 (5μg/mL)继续培养4d,检测牙髓细胞内碱性磷酸酶活性,独立样本t检验进行统计分析。结果:未受脂多糖刺激的牙髓细胞中信号蛋白p38激酶荧光主要分布于细胞浆,脂多糖刺激后30min可观察到p38激酶明显的胞核转位现象,荧光向细胞核聚集。牙髓细胞连续培养4d后碱性磷酸酶活性增强(P0.05),单独使用脂多糖(5μg/mL)或者SB203580(10μmol/L)对牙髓细胞碱性磷酸酶活性的抑制效应均具有统计学意义(P0.05),SB203580进一步抑制了脂多糖对牙髓细胞碱性磷酸酶活性的抑制效应 (P0.01)。结论:p38MAPK参与了脂多糖在牙髓细胞内的信号转导过程,其抑制剂SB203580加重脂多糖对牙髓细胞碱性磷酸酶活性的抑制效应,提示脂多糖通过p38MAPK非依赖性途径抑制牙髓细胞碱性磷酸酶活性。

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