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不同pH条件下变形链球菌Idh基因表达与产酸的相关性研究

皮根莉  刘天佳  杨锦波  姜颖  
【摘要】:目的:观察变形链球菌(变链)临床株在中性及酸性培养基中生长时产酸以及乳酸脱氢酶ldh基因表达水平的变化。方法:选择来自不同龋易感者口腔的变链临床分离株(血清c型)共20株,10株来自无龋者,10株来自龋易感者(DMFT≥6)。无龋组及高龋组变链临床株增菌后分别接种于初始pH值(pH0)为pH7.0或者pH5.5的TPY(tryptone polypeptone yeast extract broth) 培养基中,厌氧培养24小时后,pH仪检测细菌生长后培养基pH值(pH1),用pH0和pH1的差值表示菌株产酸能力。同时收集生长至指数生长中期的变链临床株菌细胞,用TRIzol抽提总RNA。根据变链ldh基因特异片段设计TaqMan水解探针,以16S rDNA 基因为内对照,实时定量PCR检测菌株ldh mRNA相对水平。t检验比较无龋组和高龋组菌株在不同初始pH值下生长时菌株产酸力以及ldh mRNA相对水平的差异。结果:变链临床菌株在酸性培养基中生长时产酸较中性者显著降低(P0.05),而在相同pH 条件下,无龋组与高龋组菌株产酸无显著差异。t检验结果显示在酸性生长环境中变链临床株ldh mRNA水平较中性条件下显著增高(P0.05)。在酸性培养基中生长时,无龋组菌株ldh mRNA水平显著高于高龋组(P0.05)。结论:变链临床株在酸性生长环境中,代谢产酸受到抑制,ldh基因表达受到诱导。酸性生长环境对无龋组菌株ldh基因表达的诱导作用更强。

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