CD34阳性兔真皮干细胞的体外分离培养和鉴定

【摘要】：[目的]探讨兔真皮干细胞的体外分离培养和鉴定方法,初步对其生长特性进行研究,并为生物组织工程提供一种新的种子细胞及成熟的分离鉴定方法。[方法]以新生新西兰大白兔为研究对象,机械法直接分离得到真皮组织,采用酶消化法获取细胞,利用干细胞贴壁粘附生长的特性获取高克隆细胞群,并进行传代筛选。应用流式细胞技术检测细胞周期,成骨诱导检测其分化潜能,免疫细胞化学法检测细胞表面分子的表达。[结果]原代培养的兔真皮细胞经过连续传代培养至第3代,细胞形态均一。流式细胞仪细胞周期分析显示,在体外培养3 d%G1=55.8,%S=34.6。免疫细胞化学显示:细胞表面波形蛋白(vimentin)、CD34表达阳性,细胞角蛋白19(cytoKeratin19)、Ⅷ因子和巢蛋白(nestin)表达阴性。[结论]新生新西兰大白兔真皮组织上存在多能干细胞,该细胞可向成骨细胞分化,具有多向分化潜能,说明真皮组织是间充质干细胞的又一重要来源,具有广阔的生物组织工程应用前景。