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漆树黄酮对脂多糖诱导的阿尔茨海默病大鼠模型的作用及其机制的研究

罗拯  唐震宇  
【摘要】:目的:漆树黄酮(Fisetin)作为一种黄酮类化合物,是漆树的主要活性成分之一,具有广泛的生物学作用。研究报道,Fisetin具有营养神经、抗炎和抗氧化作用,可能对神经退行性病变具有潜在作用。虽然目前对于Fisetin与学习记忆关系的研究较少。但近来有研究发现,Fisetin可易化突触传递的长时程增强(LTP),改善记忆障碍。因此,本实验研究Fisetin在脂多糖诱导的AD大鼠模型中的作用及机制。方法:将36只2-3月龄SD雄性大鼠,随机分为对照组,脂多糖组和脂多糖+漆树黄酮组三组,每组12只。其中对照组和脂多糖组分别给予腹腔注射7天的生理盐水和脂多糖;脂多糖+漆树黄酮组大鼠在持续腹腔注射7天脂多糖后再给予14天腹腔注射漆树黄酮处理。采用旷场实验、高架十字迷宫实验观察实验大鼠的自发活动和焦虑状态;采用Morris水迷宫和条件性恐惧实验测量实验大鼠的记忆水平;采用Western blotting技术检测ERK1/2、CaMKII和CREB及其磷酸化形式的表达情况。结果:(1)旷场实验和高架十字迷宫实验表明,三组实验大鼠的自发活动和焦虑状态无明显统计学差异(p0.05)(2) Morris水迷宫实验结果显示,定位航行训练中,LPS组大鼠逃避潜伏期明显延长(p0.05 vs.control组)。LPS+fisetin组逃避潜伏期明显缩短(p0.05vs.LPS组)。(3) Morris水迷宫实验空间探索阶段,LPS组大鼠在安全平台所在象限活动的时间明显缩短、穿越安全平台原来位置的次数明显减少、逃避潜伏期明显延长(p0.01 vs.control组)。LPS+fisetin组在安全平台所在象限活动的时间明显延长、穿越安全平台原来位置的次数明显增多、逃避潜伏期明显缩短(p0.05vs.LPS组)。(4)情景恐惧记忆测试阶段,LPS组大鼠木僵行为时间百分比明显减少(p0.05 vs.control组);LPS+fisetin组木僵行为时间百分比明显增加(p0.01vs.LPS组)。(5)在暗示性恐惧记忆测试阶段,LPS组大鼠木僵行为时间百分比明显减少(p0.05 vs.control组);LPS+fisetin组木僵行为时间百分比明显增加(p0.01vs.LPS组)。(6) Elisa结果显示,LPS组大鼠海马脑区Aβ沉积明显增加(p0.01 vs.control组);LPS+fisetin组大鼠海马脑区Aβ沉积明显降低(p0.01 vs.LPS组)(7)电生理实验显示,LPS组大鼠海马脑区LTP受损(p0.01 vs.control组);Fisetin可以改善LPS损伤的LTP (p0.01 vs.LPS组);三组之间PPF无明显差异。(8) Western blotting结果显示,LPS、fisetin均不影响CaMKII、ERK1/2、CREB的总蛋白表达。LPS组大鼠这些蛋白的磷酸化水平明显减少(p0.01 vs.control组)。LPS+fisetin组CaMKII、ERK1/2、CREB磷酸化表达水平明显增加(p0.01或0.05 vs.LPS组)。结论:腹腔注射Fisetin明显增强LPS诱导的AD模型大鼠海马脑区LTP,降低Aβ沉积,提高海马组织突触后学习记忆相关蛋白ERK1/2、CaMKII和CREB磷酸化水平,改善认知功能损害。Fisetin可作为治疗AD的潜在药物。

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