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P53在大鼠纹状体中线粒体毒素3-硝基丙酸介导的自噬和细胞死亡中的作用

张幸鼎  秦正红  
【摘要】:方法:采用脑立体定位纹状体内给药法,建立3-硝基丙酸(3-NP)所致的大鼠神经元线粒体失能毒性模型,用Real time PCR法和Western Blot法观察3-NP所致的p53、PUMA和LC3等凋亡基因和自噬的mRNA和蛋白的表达。尼氏染色法从形态学的角度观察p53抑制剂PFT对模型大鼠纹状体神经元的保护作用,Realtime PCR和Western Blot检测PFT对模型大鼠纹状体内p53、PUMA和LC3等mRNA和蛋白表达的调节。结果:结果显示模型大鼠纹状体注射3-NP后自噬的基因LC3的mRNA和蛋白在3到6小时达到高峰,p53等凋亡基因的mRNA和蛋白在6到12小时达到高峰,提示3-NP介导的线粒体失能神经毒性可使大鼠纹状体神经细胞内自噬的激活以及凋亡相关蛋白p53和p53下游基因表达增加。PFT预防性给药组和模型组相比,尼氏染色损伤面积显著减小,提示p53抑制剂PFT对3-NP介导的神经细胞损伤具有保护作用。PFT给药组可抑制3-NP引起的凋亡和自噬基因和蛋白表达的变化,提示PFT通过调控凋亡相关蛋白的表达抑制凋亡途径以及调控自噬相关蛋白的表达抑制凋亡途径而发挥神经保护作用。结论:p53在3-NP所致线粒体失能介导神经毒性导致的神经元凋亡和自噬途径中起重要作用。

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