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伴有t(16;17)(q24;q12)不平衡染色体易位,p53突变的人急性粒细胞白血病细胞系SH-2的建立和鉴定

仇惠英  薛永权  
【摘要】:目的:报道1株伴有p53突变和t(16;17)(q24;q12)所致衍生16号染色体为特征的髓系白血病细胞系的建立及其生物学特征的初步鉴定。材料与方法:取1例35岁男性AML-M2a患者骨髓单个核细胞,经过体外长期培养,建立白血病细胞系,命名为SH-2。通过系列分子生物学方法对SH-2细胞系的生物学特征全面鉴定并对t(16;17)易位的断裂进行亚定位。结果:细胞系与原代细胞具有相同的染色体异常:45,X,-Y,der(16)t(16;17)(q24;q12),-17,+19,FISH和多色FISH证实核型分析;SH-2细胞主要表达髓系CD13,CD33,MPO,NK系抗原CD16 and CD56;17号上p53探针检测显示SH-2细胞中期相一条17号染色体上存在2个绿色荧光信号为p53信号,而另一条17号染色体缺失。PCR扩增p53基因5、6、7和8号外显子所得产物经序列分析发现有p53基因的5号外显子存在突变,自p53基因起动子开始的第576号碱基G→T,密码子CAG→CAT,相应编码的氨基酸在192位处由谷氨酸→组氨酸;SH-2细胞在半固体集落培养证明SH-2细胞具有一定的集落形成能力;EB病毒和支原体检测阴性;CM-CSF、IL-3、IL-6、SCF、IL-4和IL-5促进SH-2细胞增殖;STR检测证明SH-2细胞系与患者基因型为同一来源;SH-2细胞具有体内致瘤性;通过BAC系列探针,确定16号染色体断裂点位于克隆RP11-356C4(16q24.3)内部或其端粒侧;17号染色体断裂点位于克隆RP1-161P9与RP11-47L3之间(17q12)。结论:我们建立了一个具有t(16;17)(q24;q12)不平衡易位的新的急性髓系白血病细胞系SH-2。SH-2细胞系具有明晰生物学背景,对研究具有多药耐药的AML的病理和治疗提供了有用的工具。

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