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一种高效的重组蛋白质复性方法及其机制研究

宁云山  王小宁  周宏伟  张肜  周海梦  
【摘要】:正 大肠杆菌以其基因背景清楚、表达效率高,而发酵成本极低,成为实验室和工业化生产重组蛋白质的重要工具。然而外源蛋白质在大肠杆菌高效表达时,往往形成不可溶,无生物活性的蛋白质聚集体,又称包涵体。包涵体必须经过变性→复性的过程,才能获得天然构象。然而,在绝大多数情况下,包涵体在复性过程中易发生分子间的聚沉,从而使复性产率低下(平均约20%左右)。更为重要的是,这些聚沉的蛋白质由于形成了复杂的多聚体,难以再次用强变性剂溶解,使大部分重组蛋白质成为“看得见,拿不到”的废品。

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