抗HBsAg和抗红细胞双特异噬菌体抗体的构建和表达
【摘要】：正 双特异抗体也称为双功能抗体,其两个抗原结合部位具有不同的特异性,因此可以用于免疫治疗和诊断,在临床上具有广泛的应用前景。双特异抗体是非天然的人为抗体,制备方法主要是化学交联法和细胞工程法及近几年较多应用的抗体工程法。但这些方法通常都有一定的局限性。我们曾经通过构建抗HBsAg和RBC的双特异Diabody建立了一种快速血凝检测方法,用于乙肝病人的临床诊断取得初步成功。但Diabody的构建过程复杂,表达后长期保存的稳定性也较差,因此我们在本研究中利用噬菌体展示技术设计了新型双特异噬菌体抗体模型,即在同一个噬菌体表面利用gⅧ和gⅢ呈现两种不同的抗体,以同时识别HBsAg和RBC两种抗原,用于乙型肝炎的血凝检测。 首先在同一载体上插入了抗HBsAg Fab-gⅧ和抗RBC scFv-gⅢ两段基因序列,构建了双特异噬菌体抗体表达载体,分别用Lac和Ara两种启动子进行调控,经转化大肠杆菌
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