基于Cre/LoxP系统的Smad2条件基因剔除小鼠的建立
【摘要】:正 Smads家族是最新发现的TGF-β信号转导途径中一个重要的新基因家族,它们可以直接将TGF-β信号从细胞膜转移到细胞核内。TGF-β信号分子通过跨膜苏氨酸、丝氨酸激酶受体复合体进行信号转导。SMAD2属于受体激活的SMADs,Smad2的基因位于18q21上,靠近Smad4的基因;此基因包含12个外显子。Smad2在某些散发性肿瘤中,如胰腺癌、结肠癌、肺癌,发生突变,说明它是一种可能的肿瘤抑制基因,纯合Smad2基因剔除小鼠的胚胎在E6.5天死亡。为了进一步研究Smad2在成体各组织器官及肿瘤发生中的可能作用,我们利用Cre-LoxP系统构建了Smad2条件基因剔除载体,将LoxP置于Smad2基因组序列C末端功能域两侧,并在组成型表达Cre重组酶的大肠杆菌中检测了LxoP位点的有效性。 在利用该打靶载体对ES细胞进行电击转化前,首先要制备G418抗性的小鼠胚胎干细胞滋养层用于ES细胞的培养和筛选。我们利用一个neo基因成功整合到基因组的小鼠品系
|
|
|
|
1 |
陈健,牛忠英,药立波,范金水;转化生长因子β的信号转导[J];细胞与分子免疫学杂志;1999年01期 |
2 |
杨晓,黄培堂,黄翠芬;Smads基因功能的研究进展[J];中国生物化学与分子生物学报;2000年02期 |
3 |
王尉,朴英杰,娄莉,鲍永耀;人腱细胞Smad2、Smad4基因MH2结构域的克隆和序列鉴定[J];第一军医大学学报;2001年03期 |
4 |
周江,程萱,孙彦洵,黄培堂,黄翠芬,杨晓;基于Cre/LoxP系统的Smad2条件基因打靶小鼠的建立[J];中国科学C辑;2001年04期 |
5 |
胡静,张远强,王红,张金山,许若军;Smad2和Smad4蛋白在成年大鼠睾丸的表达[J];解剖学报;2001年04期 |
6 |
王尉,朴英杰,何恢绪;转化生长因子-β_1对人胚肌腱细胞增殖和胶原及内源性Smads基因表达的影响[J];中华实验外科杂志;2001年05期 |
7 |
郑月茂,张涌;哺乳动物肺发生的调控[J];动物医学进展;2001年02期 |
8 |
周江,杨晓,黄培堂,黄翠芬;Smad2条件基因剔除载体的构建及LoxP位点有效性鉴定[J];生物技术通讯;2001年04期 |
9 |
程萱,徐晓玲,沈善祥,周江,邓初夏,杨晓;小鼠Smad3基因的克隆及其在小鼠组织中的表达[J];中国生物化学与分子生物学报;2002年01期 |
10 |
郝振明,杨晓,程萱,周江,黄翠芬;软骨组织特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的研制和鉴定[J];遗传学报;2002年05期 |
|