半夏胰蛋白酶抑制剂的性质与姜对其抑制活性影响的研究

【摘要】：目的:研究姜对纯化的半夏胰蛋白酶抑制剂(Rhizoma pinelliae trypsin inhibitor, RPTI)抑制活性的影响。方法:应用以胰蛋白酶为配体的亲和层析法,从半夏蛋白粗提液的40%的硫酸铵(M/V)沉淀中分离纯化 RPTI,应用 Edman 降解法分析其 N-端氨基酸序列。结果:纯化的 RPTI 经 SDS-PAGE 检测呈现单一条带,分子量为14kD 左右,N-端6 个氨基酸残基顺序为 DPVVDG:RPTI 对胰蛋白酶的质量抑制比约为1:4.72,为胰蛋白酶的竞争性抑制剂,抑制常数 Ki 约为7.17×10~(-6)mol.L~(-1);RPTI 对热稳定,但与姜共煎可以形成沉淀物,显著降低 RPTI 对胰蛋白酶的抑制活性。结论:生姜可以降低 RPTI 对胰蛋白酶的抑制活性。