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条斑紫菜藻胆蛋白提纯方法探索

蔡春尔  陈燕  何培民  
【摘要】:藻胆蛋白是藻类接收和传递光能进行光合作用的重要辅助色素,包括藻红蛋白、藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白,可以应用于食品和化妆品、临床荧光免疫分子检测和癌细胞光动力学治疗等方面。目前分离纯化比较困难,现有的藻胆蛋白商品主要依靠进口且价格十分昂贵。本文对条斑紫菜叶状体藻胆蛋白提纯方法进行了研究和分析。首先以硫酸铵盐析法多次沉淀藻胆蛋白,得到了较高纯度和产率的藻红、藻蓝蛋白。其次探索盐析过程中高速离心对藻胆蛋白纯度的影响,显示其可提高粗提液纯度,且对产率影响很小,但与盐析法不可互相替代。接着比较粗提液不同脱盐方法的效果,显示透析袋除盐效果好,蛋白损失少,一次上样量大,但历时较长,与凝胶过柱法正好相反。最后用羟基磷灰石法纯化蛋白,由于粗提过程去除了大量杂蛋白和藻类多糖等其它成分,一次过柱可使PE、PC的纯度分别超过了4.5和4.0,均达到了试剂级的纯度标准,产率为每克冷冻Porphyra yezoensis可纯化2.0mg和0.7mg高纯度的R-藻红蛋白和C-藻蓝蛋白,比使用一般分离方法的产率要高几十倍。本文得到的条斑紫菜藻胆蛋白提纯工艺经济高效,可大幅降低目前的提纯成本。

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