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钝顶螺旋藻突变株(SP-D)藻蓝蛋白的快速高质量纯化、光谱特性分析与晶体培养

张少斌  燕安  商树田  任东涛  刘国琴  
【摘要】:采用超声波法破碎藻体、硫酸铵分级沉淀,S-300分子筛柱层析、DEFF阴离子交换层析、羟基磷灰石吸附层析等技术,短时间内从钝顶螺旋藻高产突变株(SP-D)中分离纯化出高质量的藻蓝蛋白.通过悬滴气相扩散法对藻蓝蛋白进行晶体培养,获得了大小为0.1×0.5×0.6 mm的晶体.多种电泳分析表明:藻蓝蛋白a及β亚基分子量分别为17和19 kD,天然分子量为100-200 kD;等电聚焦证明其等电点(pI)为4.8.吸收光谱及荧光光谱同已有报道.荧光显微观察表明,在绿光及蓝光连续照射30分钟的情况下,藻蓝蛋白的抗荧光淬灭能力都强于TRIYC(异硫氰四甲基罗丹明).

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