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人胚肺成纤维细胞ncRNA基因的克隆

付汉江  朱捷  孙志贤  郑晓飞  
【摘要】:非编码RNA(ncRNA)在细胞中有着重要的生物学功能。以往研究主要是注重于蛋白质或编码蛋白质的mRNA基因,忽视了ncRNA在细胞生命活动中的重要作用,这不能不说是生命科学研究上的不足。为深入揭示细胞癌变和衰老过程中的生物学机制,我们开展了人胚肺成纤维细胞ncRNA的研究。端粒酶在细胞的癌变和哀老中起着重要作用,为此,我们将端粒酶催化亚基基因转入人胚肺成纤维细胞,经筛选获得了转基因细胞模型。采用AP-PCR技术,分析正常人胚肺成纤细细胞与端粒酶催化亚基转染的人胚肺成纤维细胞RNA表达的差异,获得基异基因Hell。序列分析表明,Hell基因位于人基因组2号染色体,未找到其他同源序列。在此序列附近没有较长的ORF区,且此序列富含终止密码子,符合ncRNA的结构特点。RT-PCR证实Hell在人胚肺成纤维细胞中确有表达。Hell序列可能是一个新的非编码RNA。其功能在研究中。

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