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Preparation, Charactorization and Preliminary Application of Monoclonal Antibody Against Human Endothelial Cell Specific Mo

【摘要】:正 To establish the monoclonal antibodies against human Endothelial Cell Specific Molecule-1(ESM-1), study itscharacterization and analyze ESM-1 expression of tumor tissues in human. Using hybridoma technique, we preparedhuman ESM-1 protein as antigen. The hybridoma cells were obtained hy fusing spleen cells of BALB/C mice to my-eloma cells SP2/0 and cultured in the HAT selective medium. The positive clones were screened by indirect ELISAand the limited dilution methods were used to select anti-human ESM-1 McAbs. We finally got the hybridoma strainwhich secreted antibody against ESM-1. McAb class and subclass were identified by Immunotype(TM)kit. The Westenblotting method was analysed the specificity of McAb. We checked the expression of ESM-1 in endothelial cell byimmune fluorescence. The relative affinity of antibody was demonstrated by indirect ELISA. We analysed ESM-1expression in normal human kidney tissues and the renal cell carcinomas by immunohistochemistry. The resultsshowed seven stains of hybridoma cells secreting anti-human ESM-1 mAbs were obtained. The McAb 3A7 secretedby one of them has the highest speciality. Its agglutinaton titer was 1: 6000 and its subclass was IgG2b. The affini-

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