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运动发酵单胞菌丙酮酸脱羧酶第27位天冬氨酸突变对醛连接酶活性的影响

吴永革  高赛学  陈文阳  巩威  周慧  李惟  
【摘要】:正 运动发酵单胞菌丙酮酸脱羧酶(zmPDC)的第27位天冬氨酸位于其辅因于焦磷酸硫胺素(ThDP)的结合区域附近.将该天冬氨酸体外定点突变为甘氨酸(D27G),并在大肠杆菌中对野生型和该突变体蛋白进行了成功地表达和纯化,测定和比较了野生型和突变体产生乙醛(主要产物)、3-羟基丁酮和乙酰乳酸(副产物,醛连接酶活性)的活性;此外,还观察了三种催化反应的时间进程曲线.由于该突变既扩大了ThDP结合区

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