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SSF对复合Aβ所致大鼠记忆障碍、脑内Ki-67、Fritin和HuD蛋白表达影响

丁圣恺  刘倩倩  陈超  张会  商亚珍  
【摘要】:目的:探讨黄芩茎叶黄酮(SSF)对β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)结合三氯化铝(AlC1_3)及重组人类转化生长因子(RHTGF-β1)(复合Aβ)所致大鼠记忆障碍及神经再生降低的影响。方法:300-350g雄性Wistar大鼠,手术第1d脑室注射RHTGF-β1,手术第2d上午侧脑室注射Aβ25-35,连续注射14d;下午AlCl_3,连续注射5d;假手术组大鼠做同样手术,但脑室注射等体积的生理盐水。大鼠在手术后第45d利用Morris大鼠水迷宫进行记忆障碍模型成功筛选,计算模型成功筛选率(SR),在动物手术第49d,记忆障碍模型成功大鼠随机分4组:模型组和三个剂量药物组。药物大鼠分别灌胃SSF35、70和140mg/kg 30d,在给药d 31利用跳台和Morris水迷宫进行大鼠记忆能力测试。水迷宫结束大鼠末次给药后断头处死取脑组织。免疫组化法观察脑内Ki-67的蛋白表达;Western blot法检测大鼠海马和皮层上Fritin和Hu D的蛋白表达。结果:Morris水迷宫模型筛选结果显示,本实验大鼠模型成功率为83.3%。跳台结果显示,不同剂量组的记忆潜伏期明显低于对照组,错误次数明显高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);Morris水迷宫结果显示,与假手术对照组相比,模型组大鼠第1、2d找到平台的潜伏期明显增加(P0.05),第3d 60s在目标象限的游泳时间、游泳路程和穿越次数都明显减少(P0.01),模型组大鼠第4、5和6d找到平台的潜伏期显著延长(P0.05);而三剂量SSF不同程度逆转复合Aβ所致大鼠上述异常改变(P0.05,P0.01)。水迷宫第7d检测各组大鼠游泳速度,发现各组大鼠找到平台的潜伏期没有明显区别。免疫组化结果发现,与假手术组相比,模型组大鼠海马、皮层Ki-67蛋白阳性表达明显降低(P0.01),三剂量SSF不同程度升高海马、皮层Ki-67蛋白阳性水平(P0.05)。Western blot法检测中Fritin蛋白表达,与假手术相比模型组明显减低,与模型组相比SSF给药组增多(P0.05);HuD蛋白表达与假手术相比模型组增高,与模型组相比SSF给药组减少(P0.05)。结论:SSF对复合Aβ所致记忆障碍和神经再生降低有明显的改善作用,其作用机制可能与调节脑内Ki-67、Fritin和HuD蛋白表达有关。

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