收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

西藏小型猪骨髓间充质干细胞(BMSCs)分离培养及慢病毒载体介导EGFP标记MSCs

唐华  毕文浩  艾威  李德胜  潘光辉  史俊文  刘薇  黄威  肖东  顾为望  
【摘要】:目的建立一种简便、有效的西藏小型猪骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)体外分离培养及纯化方法,并基于BMSCs建立慢病毒介导的外源基因EGFP体外投递系统。方法密度梯度离心法分离西藏小型猪BMSCs,差速贴壁法不断纯化,流式细胞仪检测第3代BMSCs CD45、CD90和CD105表达;此外,用携带EGFP基因的慢病毒转染BMSCs以获得EGFP标记的BMSCs,倒置荧光显微镜下观察感染情况及流式细胞术检测感染效率。结果①密度梯度分离法结合差速贴壁法所获得的细胞经鉴定符合MSCs的特性。②借助慢病毒高效率将EGFP导入BMSCs,感染效率为84.1%。结论利用密度梯度分离法结合差速贴壁法可获得高纯度的BMSCs,基于BMSCs建立了慢病毒介导的外源基因体外投递系统。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 陈雷;胡秀年;傅冷西;叶君健;;非接触性共培养BMSCs和髓核细胞时间差异性的实验研究[J];中国修复重建外科杂志;2012年11期
2 朱金海;陈燕凌;;慢病毒介导人肝细胞生长因子基因感染BMSCs的实验研究[J];中国修复重建外科杂志;2010年08期
3 王运涛;吴小涛;王锋;洪鑫;鲍军平;朱磊;;过早衰老髓核细胞微环境中BMSCs的生物学行为研究[J];中国修复重建外科杂志;2014年06期
4 陈慧;李轶杰;程百祥;杜静;张旻;陈永进;;压力对骨髓间充质干细胞(BMSCs)膜片复合富血小板纤维蛋白(PRF)双膜结构中BMSCs成软骨能力的影响[J];牙体牙髓牙周病学杂志;2013年03期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 唐华;毕文浩;艾威;李德胜;潘光辉;史俊文;刘薇;黄威;肖东;顾为望;;西藏小型猪骨髓间充质干细胞(BMSCs)分离培养及慢病毒载体介导EGFP标记MSCs[A];第十届中国实验动物科学年会论文集[C];2012年
2 孙万平;张稷;孙静;王凤鸣;谢芳;张学光;;巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖分化的影响[A];中国细胞生物学学会第九次会员代表大会暨青年学术大会论文摘要集[C];2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 黄典东;骨髓间充质干细胞(BMSCs)对肾小球足细胞mTOR的作用研究[D];福建医科大学;2014年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978