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结核菌素用于猴结核病血清抗体的检测

张钰  黄韧  林海珠  
【摘要】:目的结核病是一种人畜共患、慢性传染病,是非人灵长类的饲养和使用中重要的控制疾病。目前,猴感染结核病的检测方法是皮内进行结核菌素试验。检测方法的单一,给结核病的控制带来困难。已有报道饲养群体的结核病感染能引起群体抗体反应增高,提示抗结核病血清抗体的检测适用于饲养群体,特别是结核菌素无反应猴群。为此,我们探讨利用结核菌素作为抗原,建立了间接ELISA检测方法用于猴结核病血清抗体的检测。方法我们用不同来源的结核菌素作为抗原包被酶标板,通过棋盘滴定法确立了抗原和血清的最适工作浓度,以HRP标记的免抗猴IgG作为二抗,建立了结核菌。素用于猴结核病血清抗体的间接ELISA检测方法,并对25只结核病猴和209只健康猴进行检测。结果比较了不同来源的结核菌素的抗原性,发现牛PPD-中抗原性最好,阳性血清和阴性血情的比值(P/N)最大。利用这个抗原包被酶标板,血清稀释1:40进行间接ELISA试验,确立了该检测方法的工作条件。通过应用SPSS10.0对统计软件,以阳性血清和阴性血清的比值(P/N)结果,绘制出受试者工作特征曲线(ROC),获得检测的cutoff值(P/N=2.05),在这个点上诊断试验的敏感性达到72%,特异性达到97.6%,结合结核菌素试验结果,确定ELISA检测的阳性结果判定和解释。根据ROC曲线的分析结果,计算出曲线下面积为0.891,标准误0.042,95%的可信区域0.809-0.972,与0.5标准面积比较,P=0.000,差异有显著性。结论根据Swets判定标准,用结核菌素作为抗原建立的猴结核病血清抗体的检测,是实验室诊断结核病的一种有效方法。

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