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颗粒溶素多克隆抗体的制备、纯化及鉴定

陈波  钱  周晔  蒋天舒  葛春红  陈燕  邓安梅  仲人前  
【摘要】:正目的:构建人颗粒溶素(granulysin,GNLY)原核表达质粒pET28a(+)-GNLY并在大肠杆菌中表达,纯化得到9kD目的蛋白片段,免疫新西兰大白兔制备兔抗颗粒溶素多克隆抗体。方法:抽取正常人静脉抗凝血5ml,分离单个核细胞,培养24孔细胞板中,加Mtb 5μg和rIL-250U/孔, 培养12天后,收集细胞(约106数量级),抽提总RNA。用颗粒溶素特异性引物进行PCR,产物经琼脂糖凝

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