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重组人粒/巨噬细胞集落刺激因子下游处理研究(Ⅰ)

凌明圣  李殿俊  许祥裕  刘旭  施凤霞  丁树标  朱有华  
【摘要】:目的在成功构建人粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)高效表达克隆的基础上,对表达产物进行实验室规模和中试规模的分离、纯化及对rhGM-CSF在溶液中的稳定性进行研究。方法应用工程菌发酵、超声破菌、包涵体抽提、凝胶过滤层析、复性、离子交换等方法对rhGM-CSF进行纯化,并用GM-CSF依赖株,IF-1细胞MTT法测定其生物学活性及应用透析法测定其在溶液中的稳定性。结果终产物纯度达 99%,比活性达1.5×107u/mg蛋白。在偏硷性溶液中会发生降解,但降解后生物活性未见明显下降。结论采用分子筛色谱和阴离子交换色谱对GM-CSF进行纯化,经从实验室规模放大至中试规模证明该工艺是简便可行的,得到了高纯度、高比活性的纯品。

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1 凌明圣;李殿俊;许祥裕;刘旭;施凤霞;丁树标;朱有华;;重组人粒/巨噬细胞集落刺激因子下游处理研究(Ⅰ)[A];庆祝黑龙江省免疫学会成立十周年(1993—2003)论文集[C];2003年
2 李殿俊;凌明圣;刘旭;许祥裕;施凤霞;丁树标;朱有华;;重组人粒/巨噬细胞集落刺激因子下游处理研究(Ⅱ)[A];庆祝黑龙江省免疫学会成立十周年(1993—2003)论文集[C];2003年
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