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P2X_7受体对大鼠缺氧缺糖海马脑片/突触体谷氨酸及γ-氨基丁酸释放的介导作用

景宇淼  刘红亮  张宝岭  景亮  
【摘要】:目的观察P2X7嘌呤能受体对大鼠缺氧缺糖海马脑片、突触体谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)释放的介导作用。方法健康雄性SD大鼠,断颈处死后分离海马,制备海马脑片和神经元突触体,使用经95%O2/5%CO2饱和人工脑脊液孵化30min后分三组:(1)对照组(95%O2/5%CO2人工脑脊液);(2)OGD组(95%N2/5%CO2饱和无糖无氧人工脑脊液);(3)OGD+BBG组(亮蓝G,2mL无糖无氧人工脑脊液内含P2X7受体特异性拮抗剂BBG1μM)。分别于OGD0min、20min、40min及60min检测脑片、突触体孵育液中谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)释放量,同时HE染色观察海马脑片形态学改变。结果 OGD后20~60分与对照组相比,OGD组和OGD+BBG组海马脑片和突触体释放Glu、GABA均显著增加(P0.05)。与OGD组相比,OGD+BBG组在OGD后40、60分时点海马组织Glu释放量明显减少,但神经突触体OGD后各时点Glu释放量却显著增加(P0.05),在OGD后60分海马组织GABA释放减少(P0.05),但OGD后各时点突触体GABA释放无显著差异。组织病理学检查显示,OGD后随时间的延长海马脑片损伤加重;加入BBG后海马脑片损伤明显减轻。结论 P2X7受体对脑组织GABA释放影响甚微,但通过介导Glu释放,参与了海马脑片缺氧缺糖性损伤,阻滞P2X7受体对海马脑片缺氧缺糖性损伤有一定的保护作用。在神经元突触体,P2X7受体介导Glu释放的作用与海马组织中的效应相反,提示P2X7受体阻滞剂保护作用可能主要定位于突触体以外细胞,抑制或拮抗P2X7受体可能是脑缺血损伤治疗的一个潜在性的药物干预靶点。

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