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P2X7/P2X4受体对大鼠缺氧缺糖损伤海马脑片IL-1β合成和释放的调节作用

张宝岭  刘红亮  景宇淼  景亮  
【摘要】:目的观察嘌呤能P2X7/P2X4受体对大鼠缺氧缺糖损伤海马脑片IL-1β合成和释放的调节作用。方法应用雄性SD大鼠,断颈处死后迅速分离海马,制备400μm厚海马脑片。脑片随机分为四组:空白对照组(C组),继续以95%O2/5%CO2饱和aCSF孵育不同时间;OGD组(O组),应用95%N2/5%CO2饱和无糖人工脑脊液(aCSF)孵育脑片;OGD+BBG组(OB组),aCSF中加入P2X7受体特异性拮抗剂(BBG,1uM)后处理同O组;OGD+P2X4抗体组(OP组),aCSF中加入P2X4受体抗体(1.5ug/ml)后处理同O组,分别于缺氧缺糖前及缺氧缺糖20min、40min和60min各时点检测孵育液中的乳酸脱氢酶(LDH)浓度、IL-1β含量及细胞内IL-1β前体蛋白含量,应用HE染色观察脑片形态学改变。结果与OGD前比较,O、OB、OP组缺氧缺糖后各时点所有指标均有显著性增高(P0.05)。O组LDH释放量同C组比较显著增高(P0.05),且随缺氧缺糖时间延长而进行性升高;OB组缺氧缺糖40min和60min时点LDH释放量较O组显著降低(P0.05),而OP组缺氧缺糖各时点LDH释放量与O组无统计学差异。HE染色显示,BBG可减轻脑组织损伤,而P2X4抗体无影响。与C组相比,IL-1β在O组的释放显著升高(P0.05),OGD后20min达到高峰并维持在高水平,同时细胞内IL-1β前体明显积聚(P0.05)。与O组相比,OB组IL-1β释放明显减少(P0.05),IL-1β前体积聚进一步增加(P0.05)但OP组的上述指标与O组无统计学差异。结论炎性介质IL-1β的合成和释放在缺氧缺糖引起的脑组织损伤病理过程中起到重要的增恶作用,P2X7受体调节了脑缺氧缺糖时IL-1β的合成和释放而P2X4受体对此无作用。这些结果表明在脑缺血损伤中,抑制或拮抗P2X7受体功能可能是脑缺血损伤治疗的一个潜在性的药物干预靶点。

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