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琚田娟赵子异李颂张菁  
【摘要】:目的:N-酰基高丝氨酸内酯(AHLs)酶是一种群体感应淬灭酶,可抑制多种细菌生物膜的形成及毒力因子的释放,但其在口腔领域的研究较少。因此,本研究旨在探究新型高丝氨酸内酯酶Aii810是否抑制伴放线聚集杆菌(A.a)生物膜形成及毒力因子表达。方法:将不同浓度Aii810作用于A.a,通过结晶紫染色,荧光显微镜和SEM观察对生物膜的影响。苯酚硫酸法和实时定量PCR检测胞外多糖(EPS),白细胞毒素(lkt),细胞致死膨胀毒素(cdt)的表达。此外,CCK-8和死活染色法检测Aii810对人牙龈成纤维细胞的细胞毒性,ELISA检测经生物膜刺激后细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6 (IL-6)的表达。结果:1.结晶紫染色,荧光显微镜和SEM结果显示,各浓度的Aii810均能显著抑制A.a生物膜的形成(P0.01),且呈浓度依赖性;2.各浓度的Aii810均能显著减少毒力因子EPS,LKT和CDT的表达(P0.05);3.CCK-8和死活染色结果证实Aii810对细胞的增殖和活力没有影响;4.ELISA结果表明Aii810能抑制细胞上清液中的TNF-α和IL-6表达(P0.05)。结论:Aii810通过降解AHLs显著抑制A.a生物膜形成和毒力因子产生,并有良好的生物相容性。该实验为预防和治疗口腔感染性疾病及应对抗生素耐药性问题打开了新思路。


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